操作方法

在试管里加入蛋白质溶液，然后加入饱和硫酸铵溶液，观察现象，把加入硫酸铵溶液后的蛋白质溶液倒入另一个盛蒸馏水的试管里，观察现象。

实验现象

可以看到蛋白质沉淀出来，将其加入盛水试管里，可看到沉淀又溶解。

注意事项

饱和硫酸铵溶液不能加得太少，如加固体硫酸铵，效果更明显。

蛋白质溶液中；如加入浓的铵盐或轻金属盐溶液，可使蛋白质的溶解度降低而从溶液中析出。叫盐析。当加入水后，盐的浓度降低，少量的盐（如硫酸铵、硫酸钠等）能促进蛋白质溶解。蛋白质又重新溶解，不影响蛋白质的性质。可以通过采用多次盐析，分离和提纯蛋白质。

1、盐析是物理过程，不影响蛋白质的结构和性质。盐析是可逆的。

2、加入浓的铵盐或轻金属盐溶液，才可使蛋白质盐析。

1. 毛发的主要成分是

A. 脂肪　　B. 纤维素　　C. 蛋白质　　D. 维生素

试题难度：易

2. 下列关于蛋白质的叙述中不正确的是

    A. 蛋白质溶液中加入饱和硫酸铵溶液，蛋白质析出，如再加水蛋白质又溶解

B. 蛋白质中的蛋白质分子能透过滤纸，但不能透过半透膜

    C. 重金属盐使蛋白质变性，所以吞服“钡餐”会引起中毒              

    D. 浓硝酸溅在皮肤上，能使皮肤呈黄色是因为蛋白质和浓硝酸发生了反应

试题难度：中

3. A、B两种有机化合物，分子式都是C₉H₁₀NO₂

（1）化合物A是天然蛋白质的水解产物，光谱测定显示分子结构中不存在甲基，则A的结构简式为__________。

（2）化合物B是某种分子式为C₉H₁₂的芳香烃经硝化后的唯一产物（硝基连在苯环上），则B的结构简式为_______。

试题难度：难

分段盐析

　　对分离目的蛋白质的盐析，最好采用分段盐析。由于不同的蛋白质其溶解度与等电点不同，沉淀时所需的pH值与离子强度也不相同，改变盐的浓度与溶液的pH值，可将混合液中的蛋白质分批盐析分开，这种分离蛋白质的方法称为分段盐析法（fractional saltingout）。如半饱和硫酸铵可沉淀血浆球蛋白，饱和硫酸铵则可沉淀包括血浆清蛋白在内的全部蛋白质。

  1. 分段盐析的条件先需要进行小实验探索，如：先进行0%－30%的硫酸铵沉淀，再进行30%~60%的硫酸铵沉淀，最后进行60%－80%的硫酸铵沉淀。

2. 每一段盐析静置之后都将离心取沉淀，透析并检测活性。通过实验结果可以看出哪一段盐析出来的目的产物最多，相对来说杂质就较少。

3. 比如实验中的活性物质主要在60%－80%这段析出来，在以后的实验中，就可以首先进行0%－60%的硫酸铵沉淀，这段沉淀物可以抛弃（去处大多数杂质）；然后进行60%－80%的硫酸铵沉淀，这段沉淀出来的物质是所需要的目的物质含量比较高的物质，将其收集进行下一步纯化工作。

盐析注意事项

1. 盐析的成败决定于溶液的pH值与离子强度，溶液pH值越接近蛋白的等电点，蛋白质越容易沉淀。

2. 盐析一般用的硫酸铵，容易吸潮，因而在使用前，一般先磨碎，平铺放入烤箱内60摄氏度烘干后再称量，这样更准确。

3. 在加入盐时应该缓慢均匀，搅拌也要缓慢，越到后来速度应该更注意缓慢，如果出现一些未溶解的盐，应该等其完全溶解后再加盐，以免引起局部的盐浓度过高，导致酶失活。

4. 盐析后最好搅拌40分钟到一个小时而且再在冰浴中放置一段时间。为了避免盐对酶的影响，一般脱盐处理后再测酶活性。

5. 盐析后的蛋白质最好尽快脱盐处理，以免变性，透析较慢，一般可用超滤或者G－25，G－50 处理。

6. 一般粗提物蛋白完全沉淀是在硫酸铵浓度为70%左右。