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检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质
一、还原糖鉴定 1、白话原理 Cu(OH)2与还原糖在加热条件下,能生成砖红色沉淀Cu2O,同时葡萄糖被氧化生成葡萄糖酸。 2、拨云见日 (1)反应中被还原的是Cu(OH)2,因此,斐林试剂必须将甲液和乙液混合,生成Cu(OH)2后才能使用,同时,Cu(OH)2不稳定,因此斐林试剂需要现用现配。 (2)氧化亚铜Cu2O是砖红色的沉淀,描述实验现象的时候,要注意哦。 (3)生物学科中的还原糖主要指的是葡萄糖、果糖等单糖和麦芽糖,甜菜、甘蔗富含的是蔗糖,不能拿来做这个实验。 (4)这个实验要观察颜色,因此,所选的实验材料要求白色或接近白色,以免影响观察。 二、用苏丹Ⅲ鉴定脂肪 1、白话原理 应用苏丹Ⅲ对脂肪的亲和力极强,能把脂肪染成橘黄色,其他非脂肪部分不会被染色的原理。我们也可以理解为苏丹Ⅲ易溶于脂肪,这个原理与化学中的“萃取”极其相似。 2、拨云见日 (1)苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ均可用于鉴定脂肪,只不过颜色存在差异。 (2)这个实验要在显微镜下观察,看到的是脂肪颗粒被染成橘黄色,没有沉淀生成哦。 (3)这个实验用到了酒精,它的作用是洗去浮色。 三、蛋白质的鉴定 1、白话原理 在碱性环境中,Cu2+能与肽键(-CO-NH2—)形成紫色物质,因此蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。 2、拨云见日 (1)这个实验没有沉淀生成哦,实验现象是:溶液变成紫色。 (2)反应要在碱性环境中进行,因此在蛋白质溶液中要先加A液,并且加入A液后要振荡摇匀,目的就是创造碱性环境。 (3)最后,我们要观察颜色变化,因此双缩脲试剂B液不能过量,以“滴”为单位添加就足够了。 (4)斐林试剂与双缩脲试剂
1. 用班氏试剂鉴别健康人的下列四种液体,出现红黄色沉淀的是 A. 血清 B. 唾液 释疑:班氏试剂的有效成分与斐林试剂相同,健康人的尿液中不含糖; 答案:A 2. 下列有关实验及显色结果的叙述,错误的有 A. 水浴加热条件下,蔗糖与斐林试剂发生作用生成砖红色沉淀 B. 沸水浴条件下,脱氧核苷酸与二苯胺发生作用呈现蓝色 C. 常温条件下,蛋白质与双缩脲试剂发生作用呈现紫色 D. 常温条件下,核糖核酸与甲基绿作用呈现绿色 释疑:B选项涉及到了DNA的鉴定,DNA可与二苯胺发生作用呈现蓝色; 答案:ABD。 3. 对下表中所列待测物质的检测,所选用的试剂及预期结果都正确的是
A. ①③ B. ② ③ C. ①④ D. ②④ 答案:D 4. 进行蛋白质含量变化的预测实验,请填充实验原理;判断实验步骤中划线部分是否正确,如有错误请更正;并写出实验结果. (1)实验原理:蛋白质 ,其颜色深浅与蛋白质含量成正比 (2)实验步骤: ①将三份等量大豆种子分别萌发1、5、9天后取出,各加入适量蒸馏水,研碎、提取、定容后离心得到蛋白质制备液; ②取3支试管,编号1、2、3,分别加入等量的萌发1、5、9天的蛋白质制备液; ③在上述试管中各加入等量的双缩脲试剂A和B(按比例配制)的混合液,振荡均匀 a 后,在沸水浴中加热观察颜色变化 b a: b: (3)实验结果: . 答案:(1)与双缩脲试剂作用产生紫色反应 (2)a: 错。更正:双缩脲试剂A混合均匀后,再加入试剂B b: 错。更正:不加热或直接观察 (3)实验结果:1、2、3号试管中颜色依次加深 5. 为进一步确定来源不同的A、B、C、D、E五种物质(或结构)的具体类型,进行了下列实验,现象与结果如下: ①各种物质(或结构)的性质、染色反应的结果,见下表:
注:+:有(溶解);一:无(不溶解);灰分指物质充分燃烧后剩下的部分。 ②A为红色,检测A的灰分后发现其中含有Fe元素。 ③将适量的E溶液加入盛有D的试管中,混合一段时间后,混合液能与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀。 根据以上实验现象和结果,推断出: A、 ;B、 ;C、 ;D、 ;E、 释疑:能与双缩脲试剂发生颜色反应的物质为蛋白质,由于A为红色,检测A的灰分后发现其中含有Fe元素,因此A为血红蛋白;B无灰分,说明只有C、H、O三种元素,能与苏丹Ⅲ溶液发生颜色反应的物质为脂肪;C能与双缩脲试剂发生颜色反应,因此含有蛋白质,能与甲基绿溶液发生颜色反应,则含有DNA,同时含有蛋白质和DNA的结构为染色体;D没有灰分,则只有C、H、O三种元素,不能与苏丹Ⅲ溶液发生颜色反应,则不是脂肪,不能与碘液发生颜色反应,则不是淀粉,又不溶于水,则为大分子物质,因此可以推断为纤维素或半纤维素;E能与双缩脲试剂发生颜色反应,为蛋白质,E溶液加入盛有D的试管中,混合一段时间后,混合液能与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀,说明纤维素或半纤维素分解产生了还原性糖,根据酶的专一性可知,E为纤维素酶或半纤维素酶。 答案:A、血红蛋白; B、脂肪: C、染色质(体); D、纤维素(半纤维素); E、纤维素酶(半纤维素酶)。
1. 下列健康人的4种液体样本中,能与双缩脲试剂发生紫色颜色反应的是 ①尿液 ②胃液 ③汗液 ④唾液 A. ①③ B. ①④ C. ②③ D. ②④ 2. 下列有关对生物体内化学物质检测的实验中,正确的是 A. 向蛋清稀释液中滴加双缩脲试剂后,水浴加热可出现紫色 B. 向可溶性淀粉溶液中滴加斐林试剂后,水浴加热可出现砖红色沉淀 C. DNA与二苯胺试剂作用,出现黄绿色 D. 脂肪可被苏丹Ⅲ试剂染成橘黄色 3. 根据相关实验,回答下列问题: (1)鉴定成熟苹果果肉中存在还原性糖,所用的试剂是 ,该试剂与细胞内还原性糖发生作用,形成 沉淀,因此,可用该试剂检验糖尿病人尿液中 的含量。 (2)鉴定黄豆组织中存在蛋白质时,向组织液中加入双缩脲试剂A摇匀,再向样液中加入双缩脲试剂B摇匀。其中双缩脲试剂B的量只有3—4滴,而不能过量,为什么? 4. 斐林试剂的甲液是质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液,乙液是质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液。双缩脲试剂的A液是质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液,B液是质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液。某同学在“检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质”的实验中,产生了一些疑问,在征得老师同意后,他利用课外时间进行了探究。下表是他的探究实验的部分操作。
请分析回答下列问题。 ⑴该同学试图通过上述实验解决什么问题? ; 。 ⑵上述试管中,作为对照的是 。 ⑶要使上述试管中的溶液发生显色反应,还必须做 处理。 ⑷要提高该实验结果的可信度,还应该 。
1. D 2. D 3.(1)斐林试剂 砖红色 葡萄糖 (2)过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应,使溶液呈蓝色。而掩盖生成的紫色 4. ⑴斐林试剂的甲液和乙液必须混合后才加入组织样液中吗(或答加入斐林试剂甲液和乙液的顺序可以改变吗) 双缩脲试剂可以用于可溶性还原糖的鉴定吗 ⑵1号 ⑶加热(或水浴加热) ⑷在相同的条件下重复该实验
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1、进行还原糖的鉴定实验时,制备的苹果组织样液是无色透明的吗?
2、鉴定脂肪的实验中会观察到,有些橘黄色颗粒并不在细胞内,这是什么原因造成的?
3、斐林试剂和双缩脲试剂的反应原理有何区别?