1、白话原理

提取：叶绿体中的色素位于叶绿体中的囊状结构的薄膜上，要把它提取出来必须破坏叶表皮、细胞壁和细胞膜、叶绿体的双层膜，所以要剪碎后加二氧化硅研磨，以便使色素充分被提取。叶绿体的色素不溶于水，但可溶于有机溶剂中，所以还要加入丙酮使色素溶解，来提取各种色素。

分离：四种色素在层析液中的溶解度不同，溶解度越大，在滤纸条上扩散得越快，依据此原理使滤纸条上处于同一滤液细线上的四种色素在扩散中分离开来。

提取液，最关键的是色素在这种溶剂中的溶解度要大，溶解度越大越好；层析液，最关键的是，不同色素在这种溶剂中的溶解度差别越大越好，溶解度差别越大，层析效果越明显。

2、拨云见日

（1）取材时要选用新鲜的颜色较深的叶片，以便使滤液中含较多的色素。

（2）研磨时加入二氧化硅的目的是为了研磨得充分，更有效的破坏细胞结构；加入少许碳酸钙的目的是为了防止在研磨过程中，叶绿素受到破坏。因为叶绿素分子结构中含有一个镁原子，当细胞破裂时，细胞液内有机酸的氢可以取代镁原子而成为褐色的去镁叶绿素，碳酸钙可中和有机酸以防止去镁反应的发生

（3）研磨时要迅速、充分。一是因为丙酮容易挥发；二是为了使叶绿体完全破裂，从而能提取出较多的色素；三是叶绿素极不稳定，能被活细胞中的叶绿素酶水解而破坏。

（4）制备滤纸条时，要将滤纸条的一端剪去两角。这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀，便于观察实验结果。

（5）画滤液细线时，一定要细且直。这样可以防止色素带重叠，使色素分子均匀分布在一条直线上，做到扩散起点一致。重复画2～3次，是为了增加滤液细线上的色素分子数量，使实验效果更加明显。

（6）分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液，这是因为色素易溶解于层析液中，导致色素带不清晰，影响实验效果。

1. 从高等植物叶片中分离出4种光合色素，其中呈橙黄色的是

A. 叶绿素a       B. 叶绿素b        C. 胡萝卜素       D. 叶黄素

答案：C

2. 提取光合色素，进行纸层析分离，对该实验中各种现象的解释，正确的是

A. 未见色素带，说明材料可能为黄化叶片

B. 色素始终在滤纸上，是因为色素不溶于层析液

C. 提取液呈绿色是由于含有叶绿素a和叶绿素b

D. 胡萝卜素处于滤纸最前方，是因为其在提取液中的溶解度最高

答案：C

3. 下列有关“叶绿体色素的提取和分离”实验的叙述正确的是

A. 加入碳酸钙防止滤液挥发           

B. 用NaCl溶液提取叶片中的色素

C. 用无水酒精或丙酮分离滤液中的色素 

D. 加入二氧化硅（石英砂）有利于充分研磨

答案：D

4. 叶绿素溶液在透射光下和反射光下分别是

A. 红色、红色    B. 绿色、绿色    C. 红色、绿色    D. 绿色、红色

答案：D

5. 在叶绿体色素的提取和分离实验中，收集到的滤液绿色过浅，其原因可能是

①未加石英砂、研磨不充分      ②一次加入大量的无水酒精提取

③分次加入少量无水酒精提取    ④使用放置数天的菠菜叶

A. ①②③          B. ②③④           C. ①③④          D. ①②④

答案：D

6. 叶绿体色素的纸层析结果显示：叶绿素b位于层析滤纸的最下端，原因是

A. 分子量最小                      B. 分子量最大

C. 在层析液中的溶解度最小          D. 在层析液中的溶解度最大

答案:C

7. （1）甲同学利用新鲜的玉米绿色叶片进行“叶绿体色素提取和分离”实验，在滤纸上出现了四条清晰的色素带，其中呈黄绿色的色素带为                。

（2）该同学改变层析液组成后继续进行实验，滤纸条上只出现了黄、绿两条色素带。他用刀片裁出带有色素带的滤纸条，用乙醚分别溶解条带上的色素，浓缩后用一分析仪器检测，通过分析色素溶液的                        来判断条带的色素种类。

（3）实验结束几天后，乙、丙两同学发现部分预留叶片已变黄。乙同学认为这是由于叶片中某些色素降解所造成的，丙同学则认为某些色素含量增加。

根据所学知识，你将如何设计实验来判断两个同学的观点是否正确？

答案：（1）叶绿素b。（2）吸收光谱。

（3）从预留的叶片中挑选出足量的、份量相等、大小相近的已变黄的叶片和尚未变黄的叶片为实验材料，在相同条件下，再次进行叶绿体色素的提取分离实验，测定和记录实验结果，比较这两种叶片各种色素的组成及含量后，得出结论。

1. 某同学在做提取叶绿体色素的实验时，收集到的色素提取液为淡绿色。分析产生该结果的可能原因是

①研磨不充分，色素未能充分提取出来   ②乙醇加入量太多，稀释了色素提取液

③乙醇加入量太少，色素未提取出来     ④未加碳酸钙粉末，叶绿素分子已被破坏

A. ①②④             B. ①③④              C. ③④                 D. ①②

2. 下列关于“叶绿体色素提取和分离”的实验描述中，不属于实验要求的是（　）

A. 提取高等植物叶绿体中的色素　  B. 用纸层析法分离色素

C. 了解各种色素的吸收光谱　  　  D. 验证叶绿体中所含色素的种类

3. 通过纸层析分离叶绿体色素，结果在滤纸条上出现四条色素带，自上而下依次为 （　）

A. 胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b

B. 胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b、叶黄素

C. 叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素

D. 叶黄素、叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素

4. 在进行叶绿素提取和分离的实验时，不能让层析液没及滤液细线的原因是（　）

A. 滤纸上几种色素会扩散不均影响实验效果

B. 滤纸上的滤液细线会变粗而使色素太分散

C. 色素会溶解在层析液中，使实验结果不明显

D. 滤纸上的几种色素会混合起来不分散

5. 为了降低实验难度，使用纸层析法分离叶绿体中的色素时，将使用毛细吸管在狭窄滤纸条上描绘滤液细线的方法改为在圆形滤纸中心点样；用细棉线穿过样品中心作为层析液引流线，装置如图所示。层析结果在滤纸上呈同心圆状分布，从外向内表示叶绿素b和叶黄素的是（　）

A. c和d　　        B. c和a              C. d和b　　        D. c和b

6. 下列有关叶绿体和光合作用的几个简单小实验，你认为哪一个的结果是不可能的（　）

A. 将经饥饿处理后的绿色正常叶片置于含有充足¹⁴CO₂的密闭透明的照光小室内，3小时后在叶内淀粉中可检验到¹⁴C的存在

B. 叶绿体色素的丙酮提取液放于自然光和三棱镜之间，从三棱镜的一侧观察，连续光谱中变暗（暗带）的区域是红光和蓝紫光区域

C. 在温暖晴朗的一天下午，在某植物的向阳处采得一片叶，用酒精隔水加热脱色，并加碘液处理叶片，显微镜下观察到叶绿体变成蓝色

D. 将叶绿素的丙酮提取液置于适宜光源下照射5h，加碘液处理后溶液呈蓝色

7. 如图，做色素层析分离实验的正确装置是（　）

8. 分别在A、B、C三个研钵中加入2g剪碎的新鲜菠菜叶，并按表Ⅰ所示添加试剂，经研磨、过滤得到三种不同颜色的溶液，即：深绿色、黄褐色、极浅的绿色。

实验结果记录表：（注：“+”表示加，“-”表示不加）

试回答：

（1）A处理得到的溶液颜色是_________，原因是____________________________；

（2）B处理得到的溶液颜色是_________，原因是___________________________；

（3）C处理得到的溶液颜色是_________，原因是____________________________；

9. 某兴趣小组同学想探究蔬菜不同的叶在叶绿体色素含量上的区别，分别选择了菠菜“深绿叶”、“嫩绿叶”、“嫩黄叶”，做“绿叶中色素的提取与分离”实验。

色素层析结果如上图A、B、C三组所示，根据实验结果可知，     组滤纸条是深绿叶的，      组滤纸条是嫩绿叶的，     组滤纸条是嫩黄叶的。